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(1)酵母菌在缺水状态下处于休眠状态.活化加入水使得酵母菌恢复正常的生活状态,酵母细胞活化时体积会增大,则活化前应选择足够大的容器,以避免酵母菌溢出容器外.(2)实验成败的关键是配制海藻酸钠溶液,形成凝胶珠.(3)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠颜色过浅,所包埋的酵母细胞数目较少.(4)观察形成的凝胶珠的颜色和形状,如果颜色过浅,说明固定化酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明海藻酸钠浓度偏高,制作失败.(5)细胞个体大,难以吸附或结合,而且不易从包埋材料中漏出,则固定化细胞一般采用包埋法固定.(6)CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉.故答案为:(1)缺水 正常的生活 体积会增大 (2)配制海藻酸钠溶液 (3)较少 (4)固定化酵母细胞数目较少 海藻酸钠浓度偏高,制作失败 (5)细胞个体大,不易从包埋材料中漏出 (6)使胶体聚沉
海藻酸钠溶液浓度过高,将很难形成凝胶珠。浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。
海藻酸钠作为固定化酶的载体, 对固定化酶的酶活有显著的影响,海藻酸钠具有强烈的吸附作用, 可以与钙、铜等正二价阳离子迅速形成凝胶,海藻酸钠的浓度过大,凝胶的孔径越小, 影响酶与底物的结合,海藻酸钠浓度太小, 凝胶的孔径较大,固定化酶容易流失, 所以酶活较低.所以海藻酸钠浓度有一个最佳浓度值。
海藻酸钠溶液配制注意事项
1、海藻酸钠溶化时要用小火或间断加热,避免海藻酸钠发生焦糊。
2、将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温,再与酵母细胞混合,避免高温杀死酵母细胞。
3、固定化酵母细胞时,应将海藻酸钠酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中,而不是注射,以免影响凝胶珠的形成。
以上内容参考?百度百科-海藻酸钠
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